DMEM 培养基具备多种实用配方,以满足不同细胞的生长需求。其中,高糖型(葡萄糖浓度 4500mg/L)和低糖型(葡萄糖浓度 1000mg/L)为常见。高糖型 DMEM 培养基犹如为代谢旺盛的细胞量身定制,为其提供充足的能量来源,促使细胞快速生长、增殖,尤其适用于像肿瘤细胞这类生长迅猛、对能量需求高的细胞。而低糖型 DMEM 培养基则更契合代谢较为缓慢的细胞,为它们营造温和稳定的生长环境,保障细胞正常代谢与功能维持,在细胞培养过程中,科研人员可依据细胞特性灵活选用合适配方。MCDB131是MCDB培养基的一种,是由Knedler和Ham设计开发出来的,初用于培养人微血管内皮细胞(HMVEC)。湖南iclean细胞培养基检测
在细胞培养实验里,DMEM 培养基的使用过程需严谨规范。收到培养基后,应及时存放于 2-8°C 的环境中,低温可有效减缓培养基内成分的降解速度,确保其营养成分的稳定性。在使用前,需将培养基预热至 37°C,模拟人体体温环境,让细胞在适宜温度下开启生长旅程。同时,由于 DMEM 培养基多采用碳酸氢钠缓冲系统,需将培养环境的 CO₂浓度维持在 5 - 10%,以此精细调控培养基的 pH 值处于 7.2 - 7.4 的生理适宜区间,为细胞打造稳定且舒适的 “居住空间”,促进细胞健康生长。湖南RPMI-1640细胞培养基源头直供M199全称Medium 199,即培养基199,是Morgan等在1950年设计的,初用于鸡胚成纤维细胞的营养研究。
RPMI-1640细胞培养基已广泛应用于各种正常细胞和ai细胞的培养,包括HeLa细胞、Jurkat细胞、MCF-7细胞、PC12细胞、PBMC细胞、星形胶质细胞和ai细胞,是使用较广的培养基之一。
HEPES是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围,可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,常适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类(特别是雌)的作用,因此在用到雌敏感的细胞时(如乳腺组织),比较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。青霉素-链霉素混合液通常也被称为“双抗”。
生物药物生产过程中,DMEM 培养基扮演着关键角色。在单克隆抗体生产环节,科研人员利用 DMEM 培养基培养杂交瘤细胞,使其大量增殖并分泌高纯度的单克隆抗体。在疫苗生产方面,DMEM 培养基用于培养病毒抗原,如流感疫苗生产中,通过在 DMEM 培养基中培养流感病毒,获取足够的病毒抗原,进而制备出安全有效的流感疫苗。此外,一些重组蛋白药物的生产也依赖 DMEM 培养基培养的细胞,这些细胞在培养基提供的营养环境下,高效表达出具有***价值的重组蛋白,为患者带来希望。Leibovitz’s L-15培养基的缓冲系统由磷酸盐和游离碱基氨基酸组成,代替了传统的碳酸氢钠缓冲系统。
L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养素,但其在溶液中不稳定,会自发降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨对细胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的稳定,不会自发的降解。细胞利用其机制是:在细胞培养时,细胞会逐渐向培养液中释放一种肽酶,将L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后细胞会将这两种水解产物吸收利用。细胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的过程与流加培养策略相似,连续的将低浓度水平的L-谷氨酰胺加入到培养液中,从而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不会生成多余的氨,更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩尔的L-谷氨酰胺,适用于所有的细胞,几乎无需适应,并且可以延长细胞的培养时间,减少传代次数,即节省了时间也节约了金钱。与添加L-谷氨酰胺的培养基中培养的细胞相比,活性降低得更慢。延滞期略微延长的原因是肽酶的释放和二肽的消化需要一定的时间。NEAA(非必须氨基酸),是在MEM培养基的基础上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(门)冬酰胺、L-天(门)冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA,能降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用,有效促进细胞增殖代谢。葡萄糖可以根据研究需要。Fischer’s培养基是Glen Fischer在美国国家ai症研究所设计的,初用于小鼠白血病细胞的培养。山西昆虫细胞培养基源头直供
灵活适配血清/无血清培养,DMEM/F12助力定制化实验方案。湖南iclean细胞培养基检测
MEMα是一种改良的MEM培养基,与MEM培养基相比MEMα培养基营养更为丰富,在MEM的基础上又添加了NEAA、**酸钠、硫酸锌、VB12、生物素、抗坏血酸等成分,广泛应用于各种哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养。不含核苷和脱氧核苷的MEMα培养基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型细胞的筛选培养基。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,**适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类***(特别是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的细胞时(如乳腺组织),比较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。青霉素-链霉素混合液通常也被称为“双抗”,是体外培养中为预防微生物污染**常用的***,其中,青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成,对革兰阳性菌特别有效;而链霉素能够与细菌核糖体30S亚单位结合,抑制细菌蛋白质的合成,对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有效,但对革兰氏阴性菌特别有效。青霉素和链霉素联合使用可以预防绝大部分的细菌污染。 湖南iclean细胞培养基检测
深圳市华晨阳科技有限公司是一家致力于核酸检测、分子诊断、医学检验、病毒检测等产品研发、生产、销售于一体的国家高新技术企业。公司拥有二十多项专利,部分专利已经转化应用于市场。产品主要应用于基因检测、医疗机构、生物制药、大型甲等医院、出入境检验检疫、诊断试剂、疾控机构、刑侦法医鉴定等。近年来,公司不断加大自主研发投入,积极引进人才和技术,并与国内外多家科研机构、医学检验所以及三甲医院、基因检测公司、疾病预防控制中心等科研机构有着紧密合作,促进人类健康产业大发展。